影响抗原抗体反应的因素

　　影响抗原抗体反应的因素主要有两方面：一是反应物自身因素(如抗原、抗体);二是环境条件(如电解质、酸碱度、温度及时间等)。

　　1.反应物自身因素

　　1)抗原 抗原的理化性状、抗原决定簇的数目和种类均可影响抗原抗体反应结果。例如，可溶性抗原与相应抗体反应出现沉淀，而颗粒性抗原与相应抗体反应则出现凝集;单价抗原与抗体结合不出现可见反应;粗糙型细菌在生理盐水中易出现自凝;红细胞与IgG类抗体结合不出现直接凝集等。

　　2)抗体 抗体是抗原抗体反应中的关键因素，可表现在以下三个方面：

　　来自不同动物的免疫血清，其反应性有差异。人和马等其它大动物的免疫血清等价带较窄，少量的抗原或抗体过剩，就可形成可溶性免疫复合物;家兔等大多数动物的免疫血清具有较宽的等价带，通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;家禽免疫血清不能结合哺乳动物的补体，并且在高盐浓度(80g/L NaCl)溶液中沉淀现象明显。单克隆抗体一般不适用于沉淀反应或凝集反应。

　　特异性和亲和力共同影响试验结果的准确程度。免疫动物早期获得的抗血清特异性较好，但亲和力低;后期获得的抗血清一般亲和力较高，但长期免疫易使免疫血清中抗体的类型和反应性变得更为复杂。因此，用于诊断的试剂必须尽量选用特异性高、亲和力强的抗体，才能保证和提高试验结果的可靠性。

　　抗体的浓度是与抗原相对而言。因此许多试验应进行抗体预滴定，找出最适反应浓度。

　　2.环境条件

　　1)电解质 抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体，此时易受电解质影响。通常在抗原抗体反应中，以8.5g/L NaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝集物。若无电解质存在，则不出现可见反应。但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质沉淀，即盐析。

　　2)酸碱度 pH过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。例如，当pH为3左右时，可出现非特异性酸凝集。此时因接近细菌抗原的等电点，细菌表面蛋白或其他基团所带的电荷消失，其间互相的排斥力丧失而导致凝集，影响试验的可靠性。抗原抗体反应一般以pH6～pH9为宜。

　　3)温度 抗原抗体反应最适温度为37℃。一般在15℃～40℃范围内进行，在此范围内，温度越高，分子运动速度加快，增加抗原抗体接触机会，反应速度越快，但亦容易引起复合物解离;温度越低，反应速度缓慢，但抗原抗体结合牢固，易于观察。某些特殊的抗原抗体反应需要特定的温度，如冷凝集素在4℃时与红细胞结合，20℃以上反而解离。

　　另外，适当振荡与搅拌，可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。

（实习编辑：陈战锋）

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