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临床微生物培养基手册

2009-10-19 04:48:0039健康网社区
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核心提示:制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。 <br>

  制法:

  1将上物称好,加热溶于水中.

  2调PH8.2—8.4

  3 分装高压灭菌后备用.

  倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50℃左右,按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀, 倾注平板,凝固后备用.

  (庆大霉素:150u/毫升,多粘菌素:1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内,此相当于庆大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升)

  O2培养基

  保存液:(文—腊氏液)

  A液:硼酸 12.405克 KCL 14.912克

  水 1000毫升

  取A液250毫升 0.8%NAOH 133.5毫升

  NACL 20克 水 1000毫升

  分装高压灭菌.

  硝酸盐胨水

  成份:

  蛋白胨 1克

  硝酸钾(无NO2) 0.1克

  H2O 100毫升

  PH7.4,高压灭菌分装备用.

  (如无硝酸钾也可用硝酸钠0.02克,NACL0.05克,H2O100毫升)

  用途:硝酸盐还原试验用.

  原理:测定细菌能否还原硝酸盐为亚硝酸盐,后者在酸性条件下与a—萘胺和对氨基苯磺酸发生重氮反应,生成红色的1-萘-4偶氮苯对磺酸.

  制法:试剂甲液A对氨基苯磺酸0.8克溶于5N的醋酸100毫升.

  B:乙液a-萘酚0.5克溶于5N的醋酸100毫升中

  将细菌接种于硝酸盐水中37℃培养24--96小时,加入甲液0.1毫升,再加入乙液数滴,立即呈现红或紫色为阳性

  king氏培养基(能促进绿脓菌绿色素产生)

  成分:

  蛋白胨 2克 K2SO4 1克

  甘油 1克 MGCL2 0.14克

  琼脂 1.5克 H2O 100毫升

  KING氏培养基(能促进绿脓菌荧光色产生)

  成分:

  蛋白胨 2克 甘油 1克

  K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克

  琼脂 1.5克 H2O 100毫升

  调PH7.2 15磅20分钟消毒后使成斜面备用.

  七叶苷水解试验

  原理:

  粪链球菌能分解七叶苷(Escalin)其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀,使培养基变黑.

  方法:

  将菌种接种在七叶苷或琼脂上37℃18小时,观察结果,培养基变黑色,其他链球菌能生长但不变黑色,肺炎链球菌不长.

  成分:

  七叶苷 0.1克 胰胨 1.5克

  枸橼酸铁 0.2克 琼脂 2.0克(0.5克/50毫升)

  胆汁 2.5毫升 H2O 100毫升

  PH7.0分装小试管内高压灭菌后备用(10磅20分钟)

  七叶苷又名桑树皮甙,七叶灵,Aesclin Escnlim Bicolorin等.为白色针状结晶.水溶液兰色荧光.)

  葡萄糖氧化发酵培养基(O/F)

  成份:

  蛋白胨 2.7克 氯化钠 5.0克

  0.2%溴麝香酚兰 0.03克 琼脂 3克

  KH2PO4 0.3克 葡萄糖 10.0克

  水 1000毫升

  制法:以上成份除糖外,溶解调PH7.0,10磅高压灭菌20分钟后备用.

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