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临床微生物培养基手册

2009-10-19 04:48:0039健康网社区
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核心提示:制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。 <br>

  制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)

  用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

  罗文斯坦培养基

  成份:磷酸二氢钾 2.4克 硫酸镁 0.24克

  枸椽酸钠 0.6克 天门冬素 3.6克

  纯甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升

  马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升(约3公斤)

  2%孔雀绿水溶液 20毫升

  制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。

  2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

  3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。

  4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。

  质控标准: 1 灭菌试验合格。

  2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

  用途:作结核分枝杆菌培养用。

  结核半固体培养基

  成份:磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 0.6克

  磷酸二氢钾 2.5克 天门冬素 5克

  1%孔雀绿 1.5克 甘油 20毫升

  吐温80(10%) 5毫升 水 1000毫升

  枸椽酸钠 2.5克 动物血清 100毫升

  琼脂 1.5克(80小时用甲醇去脂)

  1%孔雀绿 0.78毫升 吐温80(10%) 5毫升

  加动物血清 100毫升

  制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。2

  2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。

  3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。

  4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。

  质控标准:1无菌实验合格。

  2琼脂硬度合适而清亮。

  3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。

  用途:培养结核杆菌用。

  亚碲酸钾血琼脂平板

  成份:琼脂基础 100毫升 10%葡萄糖 2毫升

  1%亚碲酸钾 4.5毫升 绵羊血 10毫升

  制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。

  2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,

  凝固后存冰箱备用。

  质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

  用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。

  米培养基

  成份:白米 20克 水 1000毫升

  琼脂 20克 吐温80 10毫升

  制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。

  2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。

  3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。

  质控标准:1灭菌。

  2要求清亮。

  3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。

  用途:培养白色念珠菌用。

  蛋白胨水培养基

  成份:蛋白胨 1克 氯化钠 0.5克

  水加至 100毫升 PH调至 7.8

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